EZ Trans細胞轉染試劑與EZ 慢病毒系列/真核細胞轉染試劑

轉染試劑產品描述(shu)

EZ Trans細胞轉染(ran)試劑作為新一代的(de)轉染(ran)試劑，其(qi)轉染(ran)原理是帶正電的(de)陽(yang)離子聚合(he)物與(yu)核(he)酸中(zhong)帶負電的(de)磷酸基團形成帶正電的(de)復合物后與細(xi)胞表面帶負電的(de)蛋白多糖相互作用，并通過胞吞作用進(jin)入細(xi)胞。

本(ben)產(chan)品經過李(li)記(ji)生物的優化處(chu)理，具(ju)有轉染效率高，細胞毒性低，操作簡單(dan)，重復性好，適用范圍廣等特點。

以下為高效轉染試劑說明書，EZ Trans細胞轉染試劑與EZ 慢病毒系列/真核細胞轉染試劑/其他產品詳情請問銷售人員。

細胞轉染試劑與慢(man)病毒訂(ding)購信(xin)息

轉染(ran)試劑運(yun)輸與保存

藍(lan)冰運輸(shu)。4℃保存，有效期(qi)12個月。【注(zhu)】：不可冷凍！

高(gao)效(xiao)轉染試劑使用方法(fa)（以 24 孔板為例，其他培養皿(min)中轉染請(qing)參考(kao)表1）

1. 接種細胞(bao)

對(dui)于(yu)貼壁細(xi)胞，轉染前18-24 h進行鋪(pu)板（不含抗生素(su)），使其在(zai)轉(zhuan)染時的密(mi)度大(da)約在(zai)80%左右。對于懸浮細胞，轉染(ran)當天，配(pei)制(zhi)EZ Trans-DNA復合物之前進行鋪板，每(mei)500 µL生長培養基中加入4~8×10⁵cells。  

【注】：培(pei)養液中的血清不影響轉(zhuan)(zhuan)染效(xiao)率。轉(zhuan)(zhuan)染試(shi)劑使用(yong)量(liang)受細胞類型及其他實(shi)驗條件影響，建議(yi)初次(ci)使用(yong)時設置梯度(du)進行(xing)優(you)化最佳(jia)使用(yong)量(liang)。

2. 準備(bei)EZ Trans-DNA復合物

（1）對于每孔細(xi)胞，將1 μg質粒DNA稀釋到40 μL無血清的高糖DMEM培養基（或者OPTI-MEM Ⅰ 培養基），混勻。

（2）對于每孔細胞(bao)，將3 μL EZ Trans轉(zhuan)染試劑稀釋到40 μL無血清的(de)高糖DMEM培養(yang)基（或者OPTI-MEM Ⅰ 培養(yang)基），輕輕混勻。

【注】：無血清的(de)高糖DMEM培養基是(shi)稀釋液(ye)，不能使(shi)用含血清的培養基進行DNA和(he)EZ Trans轉染試劑的稀釋。因為(wei)EZ Trans-DNA轉(zhuan)染(ran)復合物的形(xing)成(cheng)過程不(bu)能含有血清。

（3）將稀(xi)釋好的EZ Trans轉染試劑盡快全部加(jia)入到已稀釋好的(de)質粒DNA中，輕輕混勻。

【注】：此(ci)混合的順序不能(neng)反(fan)向進行。

（4）室溫放置10-15 min，以形成EZ Trans-DNA復合物。

3. 轉染細胞

（1）將(jiang)上述80 μL EZ Trans-DNA轉染復合物均勻滴入到含(han)細胞的培養皿(min)中。輕輕晃動培養皿(min)或輕微振蕩，讓EZ Trans-DNA復合物分(fen)散均勻。

（2）在37℃，5% CO₂培(pei)養箱(xiang)培(pei)養6-18 h，去除含EZ Trans-DNA復合物的(de)培養液(ye)，更換新的(de)培養液(ye)，繼續培養至對轉入基因表達分析(xi)。

【注】：篩選穩定轉(zhuan)染(ran)細(xi)胞(bao)株(zhu)，轉(zhuan)染(ran)細(xi)胞(bao)24 h后，將細胞傳代至新鮮的生長培養基中（將細胞稀(xi)釋(shi)10倍(bei)以上），在(zai)37℃，5% CO2培養箱中孵育24 h，加入篩(shai)選培養基。在(zai)有轉(zhuan)染(ran)抗性基因相匹配的藥物(wu)篩(shai)選條件(jian)下，約 1～2周可篩(shai)選到耐(nai)藥性克隆，在(zai)這期間(jian)需(xu)經常(chang)更換(huan)含篩(shai)選藥物(wu)的生長(chang)培養基。

注意事項(xiang)

1. 本產品(pin)僅限(xian)于(yu)科(ke)學實(shi)驗研(yan)究(jiu)使用，不得用于(yu)臨床診斷、治(zhi)療等領域。

公司簡介

　　上海李(li)記生(sheng)(sheng)物(wu)科技有(you)限公司(si)是(shi)一家集研發、生(sheng)(sheng)產(chan)、銷售為一體的(de)高科技生(sheng)(sheng)物(wu)技術企業，產(chan)品(pin)涵蓋細胞生(sheng)(sheng)物(wu)學、分子生(sheng)(sheng)物(wu)學、動物(wu)學等，我們的(de)產(chan)品(pin)都基于設(she)計，在保證品(pin)質的(de)前提下(xia)，具有(you)易用、經濟、高效(xiao)的(de)特點。
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